《天天向上》共有汪涵、欧弟（欧汉声）田源，钱枫、俞灏明、矢野浩二、小五（金恩圣）等来自不同地方的七位主持人。他们在节目中组成相亲相爱的“天天兄弟”，被称为“天家兄弟七人行”。从成员和人数上看，堪称内地主持超强超豪华阵容。同时外籍演员的加入使得节目更具国际化。

2008年8月节目开办，由汪涵、欧弟（欧汉声）、钱枫、田源、俞灏明、矢野浩二、陈英俊（王湘平）、董贝克8人主持。

2008年后期，陈英俊、董贝克退出主持群。

2009年4月10日，金恩圣（小五）作为嘉宾主持出现在节目中。

2009年8月，金恩圣（小五）正式加入《天天向上》节目。

2010年1月，苏醒以嘉宾主持身份出现。

2012年1月，坪井信人（浩二）代班主持。

2012年5月18日，月川雄代班主持。

2015年5月11日晚，田源发声明，称自己将暂时离开《天天向上》剧组。

2015年，欧弟因不能持证上岗离开天天兄弟，小五因会韩国服兵役离开天天向上。[5][6]

2015年12月8日，汪涵表示田源将复出重新回到天天向上，小五将于12月30日离开天天向上节目组。[7]《天天兄弟》2016年将在主持阵容上玩花样，将引进大量的小鲜独家获悉《天天兄弟》新主持阵容的宣传照，uniq王一博、fresh极客少年团中单飞的曾舜都在列。[8]

2016年1月18日，在小五离开后录制首期节目，“天天向上”在长沙进行最新一期节目录制，备受外界关注的“天天兄弟”新阵容正式曝光，休完陪产假回归的欧弟打破离开传闻，早前淡出荧屏的田源低调复出